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SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2617—2010 冬生疫霉病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Phytophthora hibernalis Carne 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2617—2010 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人:吴品珊、杜洪忠、严进。 行业标准信息服务平台 I SN/T 2617—2010 冬生疫霉病菌检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了植物检疫中冬生疫霉病菌PhytophthorahibernalisCarne的检疫鉴定方法。 本标准适用于针对冬生疫霉病菌寄主的苗木、枝条、枝叶、果实以及夹带土壤中的冬生疫霉病菌检 疫鉴定。 2原理 根据冬生疫霉病菌在寄主上的症状、形态学特征和PCR特异性扩增片段为鉴定依据。该病菌的其 他相关资料参见附录A。 3仪器 3.1生物显微镜,体视显微镜。 3.2光照生物培养箱。 3.3高压灭菌器。 3.4高速离心机。 3.5PCR扩增仪,电泳仪,凝胶成像仪。 行业标准 4i 试剂、材料和培养基 4.1试剂 4.1.1匹马霉素,利福平钠盐,苯菌灵,恶霉灵,碳酸钙(CaCO),β-谷甾醇,色氨酸,硫氨,氯化钙 (CaCl²·H,O),次氯酸钠(NaCIO)。 4.1.2琼脂糖,SDS(十二烷基硫酸钠),Tris-HCI,氯化镁,盐酸,EDTA(乙二胺四乙酸四钠盐),氢氧 化钠,乙酸钠,氯化钠,Tris,CTAB(十六烷基三甲基溴化铵),TAE,无水乙醇,苯酚,三氯甲烷,异丙醇, 异戊醇,SYBRGreenI核酸染料。 4.1.3蛋白酶K,Taq DNA polymerase,dNTP,DNA分子量Marker。 4.1.4PCR引物PHIB1/PHIB2。 4.2材料 琼脂,V8液,雪松(Cedrusdeodara)松针,柑橘(Citrusspp.)叶片,胡萝卜,玉米油。 4.3培养基 本标准所用的培养基参见附录B。 1
SN-T 2617-2010 冬生疫霉病菌检疫鉴定方法
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