ICS 65.020.20 CCS B 23 DB23 黑龙江省 地方标准 DB 23/T 3778-2024 寒地野生大豆耐盐碱性鉴定技术规程 2024-08-30 发布 2024-09-29 实施 黑龙江省市场监督管理局 发布 DB23/T 3778—2024 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 -2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由黑龙江省农业农村厅提出。 本文件起草单位：黑龙江省农业科学院耕作栽培研究所。 本文件主要起草人：刘建新、樊超、梁文卫、杨光、李炜、刘淼、毕影东、邸树峰、李佶恺、张舒 昱。 DB23/T 3778—2024 1 寒地野生大豆 耐盐碱性 鉴定技术规程 1 范围 本文件规定了寒地野生大豆耐盐碱性鉴定的术语和定义、鉴定溶液配制、芽期耐盐碱性鉴定、苗期 耐盐碱性鉴定、耐盐碱性分级标准。 本文件适用于寒地 野生大豆种质资源的耐盐碱性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 5520 粮油检验 发芽试验 DB23/T 2024 寒地野生大豆资源扩繁更新技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本 文件。 3.1 野生大豆 耐盐碱性 野生大豆对盐碱环境的敏感程度。 4 鉴定溶液的配制 4.1 基础盐碱液配制 配制1000 mmol· L-1的基础盐碱液 1 L：2.96 g NaCl，5.30 g Na 2CO 3，37.80 g NaHCO 3，63.90 g Na2SO 4，摩尔比为 1:1:9:9，分别用 无菌水溶解，混合后定容至 1 L。灭菌锅高压 121 ℃，20 min灭菌 后，4 ℃冰箱冷藏保存。 4.2 芽期胁迫盐碱液配制 芽期的盐碱溶液浓度为 80 mmol· L-1，即取出 80 mL基础盐碱液，用无菌水定容至 1 L。 4.3 苗期胁迫盐碱液配制 苗期的盐碱溶液浓度为 200 mmol· L-1，即取出 200 mL基础盐碱液，用基础营养液定容至 1 L。 基础营养液盐分组成与浓度按 表1。 DB23/T 3778—2024 2 表1 基础营养液盐分组成与浓度 组分 盐分浓度 mg·L-1 组分 盐分浓度 mg·L-1 KNO 3 253.00 H3BO 3 6.20 NH 4NO 3 40.00 MnSO 4 22.30 KH 2PO 4 68.00 ZnSO 4 8.60 MgSO 4 120.50 Na2MoO 4 0.50 C10H12N2NaFe 36.70 CuSO 4 0.05 KI 0.83 CoCl 2 0.05 Ca（NO 3）2 472.50 5 芽期耐盐碱性 鉴定 5.1 种子选择与处理 5.1.1 种子选择 选取收集或保存的寒地野生大豆，经单粒传的后代 。 5.1.2 种子处理 按DB23/T 2024 规定的方法 ，对种子进行 破皮处理。 破皮后的野生大豆种子用 75%的乙醇溶液浸泡 1 min，期间充分震荡，进行表面消毒，消毒后的种子用无菌水清洗 3次，置于灭菌后的滤纸上吸干表面 水分。 5.2 培养 5.2.1 播种 宜采用55 mm直径的培养皿培养，将两层 55 mm直径的定性滤纸置于培养皿底部铺平，将处理好的 种子每皿均匀摆放 20 粒，每份材料 6 皿。 5.2.2 胁迫处理 将3 皿加入3 mL芽期胁迫盐碱液； 3 皿加入3 mL无菌水作为空白对照。盖好盖子，做好标识 ， 进行培养。 每隔一天先将残余的水分吸走，用盐碱胁迫溶液冲洗滤纸 2~3 次，吸净残余水分后再补充 3 mL胁 迫溶液，对照加入无菌水。 5.2.3 培养条件 按照GB/T 5520 标准在培养箱中进行 暗培养，培养温度为 25 ℃。 5.3 调查 5.3.1 发芽势