ICS 67.040 X 04 中华人民共和国国家标准 GB/T 5513—2019 代替GB/T5513—2008 粮油检验 粮食中还原糖和非还原糖测定 Inspection of grain and oils-Determination of reduced sugar and non-reduced sugar in grain 2019-12-01实施 2019-05-10发布 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 5513—2019 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准代替GB/T5513—2008《粮油检验 粮食中还原糖和非还原糖测定》。 本标准与GB/T5513—2008相比主要技术变化如下： 增加了规范性引用文件GB/T5490（见第2章）； 一增加了费林试剂法垂融埚规格（见5.3.5）； 修改了费林试剂法容量瓶体积（见5.3.11，2008年版的12.9）； 一修改了费林试剂法样品称样质量（见5.4.2，2008年版的13.2）； 修改了费林试剂法非还原糖计算公式（见5.5.2，2008年版的14.2）。 本标准由国家粮食和物资储备局提出 本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270)归口。 本标准起草单位：中储粮成都储藏研究院有限公司 本标准主要起草人：姜涛、杨超、陈晋莹、付爱华、冯永建。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T5513—1985,GB/T5513—2008。 1 GB/T5513—2019 粮油检验粮食中还原糖和非还原糖测定 1范围 本标准规定了粮食中还原糖和非还原糖测定的术语和定义以及铁氰化钾法和费林试剂法两种方法 测定还原糖和非还原糖的原理、试剂、仪器和用具、操作步骤、结果计算及重复性 糖和非还原糖的测定 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T5490粮油检验一般规则 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 还原糖 reduced sugar 分子结构中含有游离半缩醛羟基或半缩酮羟基的糖。 3.2 非还原糖 non-reduced sugar 分子结构中不含游离半缩醛羟基或半缩酮羟基的糖。 4铁氰化钾法 4.1原理 还原糖在碱性溶液中将铁氰化钾还原为亚铁氰化钾，本身被氧化为相应的糖酸。过量的铁氰化钾 在乙酸的存在下，与碘化钾作用析出碘，析出的碘以硫代硫酸钠标准溶液滴定。通过计算氧化还原糖时 所用去的铁氰化钾的量，查经验表得试样中还原糖的百分含量 4.2试剂 除非另有说明，本标准仅使用确认为分析纯的试剂。 4.2.1水：符合GB/T6682中三级水的要求 4.2.295%乙醇。 4.2.3乙酸缓冲液：将3.0mL冰乙酸、6.8g无水乙酸钠和4.5mL浓硫酸混合溶解，然后用水稀释至 1 000 mL,混匀。 1 GB/T5513—2019 4.2.412%钨酸钠溶液：将12.0g钨酸钠溶于100mL水中。 4.2.50.1mol/L碱性铁氰化钾溶液：称取32.9g铁氰化钾与44.0g碳酸钠溶于1000mL水中。 4.2.6乙酸盐溶液：将70g氯化钾和40g硫酸锌溶于750mL水中，然后缓慢加入200mL冰乙酸，用 水稀释至1000mL，混匀。 4.2.7氢氧化钠饱和溶液：称取120g氢氧化钠，加100mL水，振摇使之溶解成饱和溶液，冷却后置于 聚乙烯塑料瓶中，密塞，放置数日，澄清后备用。 4.2.810%碘化钾溶液：称取10g碘化钾溶于100mL水中，再加1滴饱和氢氧化钠溶液 4.2.91%淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量水润湿调和后，缓慢倒入100mL沸水中，继续煮沸 直至溶液透明。 4.2.10 0.1mol/L硫代硫酸钠标准滴定溶液：按GB/T601配制与标定 4.3 仪器和用具 4.3.1 分析天平：分度值0.001g。 4.3.2 振荡器。 SIG 4.3.3粉碎磨。 4.3.4水浴锅。 4.3.5 量筒：25mL、50mL。 4.3.6 移液管：5mL。 4.3.7 75mm玻璃漏斗。 4.3.8试管：直径1.8cm~2.0cm，高约18cm 4.3.9 磨口具塞锥形瓶：100mL。 4.3.10 锥形瓶：100mL。 4.3.11 微量滴定管：5mL或10mL。 4.3.12 12.5mm中速定性滤纸。 4.4# 操作步骤 4.4.1试样制备 取混合均匀的试样，用粉碎磨（4.3.3）粉碎，使试样90%通过孔径0.27mm（60目）筛，合并筛上、筛 下物，充分混合，保存备用。 4.4.2样品液制备 精确称取试样（4.4.1)5.675g于100mL磨口具塞锥形瓶（4.3.9）中。倾斜锥形瓶使所有试样集中 人2mL12%钨酸钠溶液（4.2.4），在振荡器（4.3.2）上混合振摇5min。将混合液过滤，弃去最初几滴滤 液，收集滤液于干净锥形瓶（4.3.10）中，此滤液即为样品测定液。另取一锥形瓶（4.3.10）不加试样，同上 操作，滤液即为空白液 4.4.3还原糖的测定 4.4.3.1氧化：用移液管（4.3.6）精确吸取样品液5mL于试管（4.3.8）中，再精确加人5mL0.1mol/L 3cm~4cm，加热20min后取出，立即用冷水冷却 4.4.3.2滴定：将试管内容物倾人100mL锥形瓶（4.3.10）中，用25mL乙酸盐溶液（4.2.6）荡洗试管， 2 GB/T5513—2019 内容物一并倾人锥形瓶中，加入5mL10%碘化钾溶液（4.2.8），混匀后，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠 标准滴定溶液（4.2.10）滴定至淡黄色，再加1mL1%淀粉溶液（4.2.9），继续滴定至蓝色消失，记下消耗 的硫代硫酸钠溶液体积（V）。 4.4.3.3空白试验：吸取空白液5mL，代替样品液按4.4.3.1和4.4.3.2操作，记下消耗的硫代硫酸钠标 准滴定溶液（4.2.10）体积（V。）。 4.4.4非还原糖的测定 分别吸取样品液（4.4.2）及空白液（4.4.2）各5mL于试管中，先在剧烈沸腾的水浴中加热15min （样品液中非还原糖转化为还原糖），取出迅速冷却后，加入0.1mol/L碱性铁氰化钾溶液（4.2.5）5mL 混匀后，再放入沸腾水浴中继续加热20min，取出迅速冷却后，立即按4.4.3.2方法进行滴定，分别记下 滴定样品液及空白液消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液（4.2.10）的体积（V，、V。）。 4.5结果计算 4.5.1还原糖含量的计算 根据氧化样品液中还原糖所需0.1mol/L铁氰化钾溶液的体积查附录A中表A.1，即可查得试样 中还原糖（以麦芽糖计）的质量分数。铁氰化钾溶液体积（V：）按式（1)计算： ...(1) 0.1 式中： V3一氧化样品液中还原糖所需0.1mol/L铁氰化钾溶液的体积，单位为毫升（mL）； V。—滴定空白液消耗0.1mol/L硫代硫酸钠溶液的体积，单位为毫升(mL)； Vl—滴定样品液消耗0.1mol/L硫代硫酸钠溶液的体积，单位为毫升（mL)； 硫代硫酸钠标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）。 计算结果保留小数点后两位 测定结果不符合重复性要求时，应按GB/T5490的规定重新测定，计算结果。 0.1mol/L铁氰化钾体积与还原糖含量对照可查表A.1。 注：还原糖含量以麦芽糖计。 4.5.2非还原糖含量的计算 非还原糖含量根据氧化样品液中总还原糖所需的0.1mol/L铁氰化钾溶液的体积（V,），减去氧化 非还原糖（以蔗糖计）的质量分数。铁氰化钾溶液的体积（V4）按式（2)计算： (V。-Vr) Xc V= ...(2) 0.1 式中： V一氧化样品液中总还原糖所需0.1mol/L铁氰化钾溶液体积，单位为毫升（mL）； V。——滴定空白液消耗硫代硫酸钠溶液体积，单位为毫升（mL)； VI——滴定样品液消耗硫代硫酸钠溶液体积，单位为毫升（mL）； 硫代硫酸钠标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）。 C 计算结果保留小数点后两位。 测定结果不符合重复性要求时，应按GB/T5490的规定重新测定，计算结果。 0.1mol/L铁氰化钟体积与非还原糖含量对照可查表A.2。 注：非还原糖含量以蔗糖计。 3