UDC. 621. 039. 8 F 54 中华人民共和国国家标准 GB/T15477--1995 三碘甲腺原氨酸、甲状腺素放射免疫 分析试剂盒 Triiodothyronine,thyroxine radioimmunoassay kit 1995-10-01实施 1995-01-27发布 国家技术监督局 发布 中华人民共和国国家标准 GB/T 15477-1995 三碘甲腺原氨酸、甲状腺素放射免疫 分析试剂盒 Triiodothyronine,thyroxine radioimmunoassay kit 1主题内容与适用范围 本标准规定了三碘甲腺原氨酸（T）、甲状腺素（T）放射免疫分析试剂盒的技术条件。 本标准适用于聚乙二醇(PEG)为分离剂的T，、T,放射免疫分析试剂盒。采用其它分离方法的T3、 T,放射免疫分析试剂盒也可参照使用。 2引用标准 GB11806放射性物质安全运输规定 EJ/T804放射性同位素产品代号 3术语 3.1放射免疫分析试剂盒radioimmunoassaykit 由放射性示踪物、参照物（标准品）、结合试剂及分离剂等有关材料组装在一起，按照其操作说明，利 用抗原抗体特异性结合反应，在体外测定某一特定物质量，并能达到一定精确度的试剂组合。 3.2非特异结合率nonspecific binding percent(NSB) 放射免疫分析中，不加抗体时，标记抗原与其他试剂的结合的放射性计数率与加入的总放射性计数 率的比值，以百分数表示。 3.3最大结合率maximum binding percent(B,) 放射免疫分析中，在不加标准物或被测定物的条件下，即零剂量时，标记抗原与抗体结合的放射性 计数率与加入的总放射性计数率的比值，以百分数表示。又称零标准管结合率。 3.4剂量反应曲线dose-responsecurve 标记抗原和非标记抗原与抗体结合数量之间的函数关系图，俗称标准曲线， 3.5 批内变异系数within assay variation 在一次测定中，经同一样品的多次测定而确定的变异系数。 3.6批间变异系数between assay variation 在多次测定中，经同一样品的多次测定而确定的变异系数。 3.7 回收率 recovery 在放射免疫分析中，测得的被测物的量与加入的被测物的已知量之比。 3.8标准品standard 系指放射免疫分析中，用于度量被测物的参照物。该参照物一般与被测物有相同的化学结构和免疫 活性，且性能稳定。 3.9质量控制血清 quality control serum 国家技术监督局1995-01-27批准 1995-10-01实施 1 GB/T 15477-1995 用来评价和检定测定试剂或试剂盒的血清。 4产品代号及试剂盒的组成 4.1产品代号 根据EJ/T804的规定编写产品的代号：T，放射免疫试剂盒产品代号RIAI1251011X，T，的放射 免疫试剂盒产品代号RIAI1251021×。 4.2试剂盒的组成 1251-标记抗原； b. 标准品： c. 抗血清； d. 分离剂（PEG）。 5技术要求 5.1灵敏度 T,的浓度不低于0.3nmol/L,T,的浓度不低于6.0nmol/L。 5.2非特异结合率 不大于10%；其它分离方法不大于5%。 5.3最大结合率 应在40%~65%之间。 5.4精密度 用样品测定值的变异系数表示。批内变异系数不大于10%（n≥10），批间变异系数不大于15%（n≥ 10)。 5.5准确度 用质基控制血清的测定结果表示。在一次测定中，低、中、高三个不同剂量的质量控制血清的测定结 果，至少有两个在允许范围（z士2SD)内。 5.6回收率 T:应在 95%～105%之间,T,应在 97%～102%之间。 5.7相关系数和有效剂量值 剂量反应曲线的相关系数的绝对值应不小于0.99。有效剂量ED25,ED50和ED75值的变化应 在相应的允许范围内。 5.8测定范围 T,的浓度应在～13 nmol/L,T,的浓度应在 0～309 nmol/L。 5.9有效期 在2～8C条件下贮存，从出厂日期计算有效期不少于35d。 6试验方法 6.1灵敏度的测定 按附录A（补充件)和附录B(补充件)的实验程序操作。以B/T值为纵坐标，以T：、T,的浓度为横 坐标，在直角坐标纸上作剂量反应曲线。求出零标准管结合率（B,)的标准差SD(n10）。以零标准管结 合率的均值减去2SD所得结合率的相应剂量值，即为试剂盒的灵敏度。 6.2非特异结合率(NSB)的测定 取两支放免试管，分别加入与测定样品相同体积的T：、T.零标准血清和对应的1251-标记抗原及与 抗血清相同体积的温育液，然后按附录A(补充件)和附录B(补充件)实验程序操作。非特异结合率 NSB 2 GB/T 154771995 按公式(1)计算。 NSB - X 100% (1) C -Cb 式中：C——非特异管计数率; C-仪器本底计数率; C.总放射性管计数率。 6. 3最大结合率(B.)的测定 按附录A(补充件)和附录B(补充件)实验程序操作，最大结合率B。按公式(2)计算。 Co- C. B. X 100% (2 ) 0-0 式中：C。~-零标准管计数率。 6.4精密度的测定 精密度用质量控制血清或样品测定值的变异系数表示。按附录A（补充件）和附录B(补充件）实验 程序操作，变异系数 CV按公式(3)计算。 SD X 100% (3) 式中：SD一n 次测定T，、T 的浓度值的标准偏差,nmol/L; -n次测定T,、T,的浓度的均值(n≥10),nmol/L。 6.5准确度的测定 按附录A(补充件)和附录B(补充件)实验程序操作，计算质量控制血清测定值的 SD。 6.6回收率的测定 在已知 T、T,浓度的血样中加入一定量的 T,T,,然后测定血样中总 T、T,浓度。按附录 A(补充 件)和附录B(补充件)实验程序操作，回收率R按公式(4)计算。 (4) D. 式中：D,一一血样中测定的总 T.、T 的浓度值,nmol/L; Dk--血样中已知 T3、T,的浓度值,nmoi /L; D,—一血样中加入的 T.、T,的浓度值,nmol /L。 6.7剂量反应曲线 6.7.1曲线的绘制 按附录A（补充件）和附录B(补充件)实验程序操作。各标准剂量点的放射性结合率B/B。按公式 (5)计算。 SAC B/B,= (5) C. -- C. 式中：C一一各标准剂量点计数率。 以各标准剂量点的放射性结合率为纵坐标，以各相应标准剂量点的浓度为横坐标，在半对数坐标纸 上绘制剂量反应曲线。 6.7.2r、ED值计算 由Logit(B/B。)对剂量的对数值作图，通过直线回归处理求出r、ED25、ED50、ED75。以ED25、 ED50、ED75的值（即结合率B/B。分别为25%，50%和75%时的对应值）来判断剂量反应曲线的漂移 及偏倚。 7检验规则 7.1型式检验 3 GB/T 15477-1995 产品投产前及投产后工艺流程的改变和原料变更，均须按本标准技术要求中规定的内容检验。 7.2出厂检验 7.2.1全检项目 对每批生产的每一个试剂盒都要实行检查，检查内容包括试剂盒组份、包装及标志应符合本标准的 规定。 7.2.2抽检项目 试剂盒出厂前由生产单位的质量检验部门进行抽检。抽检项目包括NSB、B。、剂量反应曲线及质量 控制血清测定值应符合本标准的规定。 7.2.3抽检方式 抽检采取随机取样方式。批量100盒以下抽取1盒，101～300盒抽取2盒，301～500盒抽取3盒， 501盒以上抽取4盒。如果检验结果有一项不符合本标准的要求，应重新以两倍的数量随机取样进行核 验。重新核验的结果，即使只有一项指标不符合本标准所规定的要求，则整批试剂盒判为不合格。 7.2.4检验证书 检验合格应填写产品合格证书，见附录C(补充件）。 8标志、包装、贮存和运输 8.1标志 8.1.1试剂盒封面标志 试剂盒封面标志应包括： a. 生产厂家； h. 产品名称； c. 注册商标； d. 产品代号； 产品批号： e. f. 批准文号： g. 注意事项； h. 有效期。 8.1.2试剂标志 试剂瓶标志应包括： a. 名称； b. 批号； c. 浓度； d. 贮存条件； 失效期。 e. 8. 1. 3放射性试剂瓶标志 放射性试剂瓶标志应包括： 名称； a. b. 批号； 放射性浓度； d，测量H期： 放射性标志。 8.2包装和运输 8.2.1包装 4