ICS 67.040 C 53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.171—2003 保健食品中超氧化物歧化酶（SOD） 活性的测定 Determination of the action of superoxide dismutase in health foods 2004-01-01实施 2003-08-11发布 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 5009.171—2003 前言 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准负责起草单位：吉林市卫生防疫站、吉林医学院。 本标准第一法主要起草人：袁彦华、罗速、于敬伟、孙连军、赵凤明， 本标准第二法主要起草人：罗速、袁彦华、张吉林、卢忠魁。 GB/T 5009.171—2003 引言 超氧化自由基Oz可以造成机体细胞损伤。超氧化歧化酶（SOD)能够清除机体内Oz。食品中 SOD活性的测定，国内外尚无标准检验法。因此，卫生部九五制标规划确定了食品中SOD活性测定的 研究课题。 本标准以修改的Marklund方法和化学发光法测定食品中SOD活性。前者SOD活性测定最低检 活性测定最低检出浓度为0.033U/mL，相当于3.0×10-10mol/L，灵敏度比前者提高约二个数量级。 具有更加灵敏、快速和干扰少等优点，但试剂较贵，可应用于仲裁或科研。两种测定方法对同一SOD酶 测定结果无显著差异（P>0.05）。 GB/T5009.171—2003 保健食品中超氧化物歧化酶（SOD） 活性的测定 1范围 本标准规定了食品中超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定方法。 本标准适用于各类食品中超氧化物歧化酶（SOD)活性的测定。 本方法第一法检出限1.17U/mL：第二法检出限0.033U/mL。 第一法修改的Marklund方法 2定义 25℃时抑制邻苯三酚自氧化速率50%时所需的SOD量为一个活力单位。 3原理 在碱性条件下，邻苯三酚会发生自氧化，可根据SOD抑制邻苯三酚自氧化能力测定SOD活力。 4试剂 4.1A液:pH8.200.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）-盐酸缓冲溶液（内含1mmol/LEDTA·2Na）。 称取1.2114gTris和37.2mgEDTA·2Na溶于62.4mL0.1mol/L盐酸溶液中，用蒸馏水定容至 100 mL。 4.2B液：4.5mmol/L邻苯三酚盐酸溶液。称取邻苯三酚（A.R)56.7mg溶于少量10mmol/L盐酸 溶液，并定容至100mL。 4.310mmol/L盐酸溶液。 4.40.200mg/mL超氧化歧化酶（SOD)。 4.5蒸馏水：二重石英蒸馏水。 5仪器 5.1 紫外-可见分光光度计。 5.2精密酸度计，精确度0.01pH。 5.3离心机。 5.410mL比色管。 5.510mL离心管。 5.6玻璃乳钵。 6试样的制备 6.1固体样品（茶、花粉等）称取1.00g样品置于玻璃乳钵中，加人9.0mL蒸馏水研磨5min，移人 15min，取上清液测定。 6.2澄清液体样品可取原液直接测定，浑浊液体样品经4000r/min离心15min，再取上清液测定。