ICS 67.120. 10 X 04 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T207982006 肉与肉制品中2.4-滴残留量的测定 Determination of 2,4-D in meat and meat products 2006-11-28发布 2007-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T20798—2006 前言 本标准主要参考了美国食品药品管理局的农药残留分析手册（FDA一PAM)中的有关方法，并参考 SN0195—1993《出口肉及肉制品中2，4-滴残留量检测方法》和《CIPAC手册》中有关2，4-滴的测定 方法。 本标准由中国商业联合会提出并归口。 本标准由农业部农产品质量监督检验测试中心（北京）、商务部屠宰技术鉴定中心负责起草。 GB/T20798—2006 肉与肉制品中2，4-滴残留量的测定 1 范围 本标准规定了肉及肉制品中2，4-滴残留量检验的抽样和测定方法。 本标准适用于肉及肉制品中2，4-滴残留量的测定。 2原理 剂洗涤后将其酸化，再用二氯甲烷提取2，4-滴。去除溶剂后用乙睛定容作为待测溶液，取一定量注入 高效液相色谱仪，用紫外检测器检测，外标法定量。 3试剂与仪器、设备 3.1试剂 3.1.1乙睛：色谱纯 3.1.2水：三级水。 3.1.3磷酸：分析纯。 3.1.4二氯甲烷：分析纯，重蒸馏。 3.1.5无水乙醇：分析纯，重蒸馏。 3.1.6无水乙醚：分析纯，重蒸馏。 3.1.7硫酸-水（1十9）：以优级纯浓硫酸配制。每500mL硫酸-水（1十9）用50mL二氯甲烷抽提两次 后备用。 3.1.8氢氧化钠溶液（30g/L）：以优级纯氢氧化钠配制。每500mL氢氧化钠溶液（30g/L)用25mL 二氯甲烷抽提两次后备用。 3.1.9氯化钠：优级纯，每250g氯化钠用100mL二氯甲烷超声波抽提两次，挥干，于600℃灼烧4h， 贮于具塞瓶中。 3.1.10饱和氯化钠溶液：以优级纯氯化钠配制。每250mL饱和氯化钠溶液用25mL二氯甲烷抽提 两次后备用。 3.1.112，4-滴标准品：纯度99%。 3.1.1224-滴标准溶液：准确称取10mg2，4-滴标准品用乙睛溶解并定容至100mL，配制成浓度为 0.100mg/mL标准贮备溶液。再以乙睛稀释逐级稀释成适当浓度的标准工作溶液。 3.2仪器和设备 3.2.1高效液相色谱仪：附紫外检测器。 3.2.2组织捣碎机。 3.2.3振荡器。 3.2.4旋转蒸发仪。 注：全部玻璃器血经超声波清洗，用前以少量二氯甲烷淋洗。 4分析步骤 4.1抽样 4.1.1零散样品 若成堆产品，则在堆放空间的四角和中间设采样点，每点从上、中、下三层若干小块混为一份样 1 SAG GB/T20798—2006 品；若零散样品，则随机从3~5片躺体上取若干小块混为一份样品。每份500g～1500g。 4.1.2检验批 以不超过5000箱为一检验批。同一检验批内商品应具有同一的特征，如包装、标记、产地、规格、 等级等。 4.1.3抽样数量 4.1.3.1肉 a）500箱及以下取5箱； b) 501~1000箱取7箱； c） 1001～3000箱取11箱； 3001~4000箱取13箱； 4001~5000箱取15箱。 4.1.3.2罐头 a) 500箱及以下取5箱； b) 501~1000箱取7箱； c) 1001～3000箱取11箱； d）3001~4000箱取13箱； e）4001~5000箱取15箱。 4.1.4抽样工具及方法 4.1.4.1肉 每箱取样一包，去掉塑料薄膜，从每包肉样中抽取肉块不少于25g.总样量不少于1kg，放入清洁 的容器内，填写标签，注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、取样人，并及时送交实验室。 4.1.4.2罐头 每箱取一罐，填写标签，注明品名、日期、垛位、报验号、申请单位、取样人，及时送交实验室。 4.2试样制备 4.2.1肉 将所取全部样品，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装入清洁容器内，密封， 冷藏。 4.2.2罐头 将所取全部样品整罐倒出，充分搅碎混匀，取有代表性的样品，总量不少于500g，装入清洁容器内， 密封，冷藏。 注：在抽样和制样的操作中，应防止样品受到污染或发生任何变化，以保证实验样品能代表总体样本。 4.3提取和净化 称取混合均匀的试样20.00g（精确到0.01g）于500mL具塞锥形瓶中，加15mL无水乙醇5mL 硫酸-水（1十9）、10g氯化钠和100mL二氯甲烷。加塞，振荡提取30min。通过快速滤纸过滤，滤液收 集于500mL分液漏斗中，用约50mL二氯甲烷分三次洗涤锥形瓶及滤渣。合并洗液于分液漏斗中，于 上述分液漏斗中加25mL氢氧化钠溶液（30g/L）和50mL蒸馏水，再加人10mL饱和氯化钠溶液【此 时水相pH应大于12，否则应补加适量氢氧化钠溶液（3.1.8）。对于极易乳化的样品可再补加约3g氯 化钠］，振摇提取2min。静置分层，弃去二氯甲烷层。以25mL二氯甲烷洗涤水层二次，弃去二氯甲烷 层。再以25mL无水乙醚洗涤水层，静置分层，将下层水相转移至另一500mL分液漏斗中，弃去无水 乙醚层。于上述水相中，加人25mL硫酸-水（1十9）进行酸化，摇匀水相pH应小于2，否则应适量补 加硫酸-水（1十9）J,然后分别用50mL、25mL、20mL二氯甲烷提取水相。将二氯甲烷提取液收集于 2 GB/T20798—2006 250mL旋转蒸发瓶中。于30℃水浴中蒸干。用2mL乙睛溶解，经0.45um微孔滤膜过滤后供色谱 测定。 4.4测定 4.4.1 色谱参考条件 a) 色谱柱：ODSCig3.9mmX150mm； b) 流动相：乙腈+1.5%氢氧化钠（NaOH)水溶液（20+80），加磷酸调节pH至2.95； c) 流速:1.0 mL/min; d) 温度：30℃； 检测器：紫外检测器； e) f) 检测波长：228nm。 4.4.2测定 根据液相色谱仪灵敏度，取标准系列各浓度20，L分别注人液相色谱仪，测得该浓度标准溶液的峰 面积（峰高）。以标准溶液浓度（μg/mL）为横坐标，峰面积（峰高）为纵坐标绘制标准曲线。 取样品溶液20L注人液相色谱仪，测得2，4-滴的峰面积（峰高）。从标准曲线中查出相应的浓度 (μg/mL)。5c 4.5结果计算 采用外标法用峰面积（峰高）定量，按式（1)计算2，4-滴残留量。 ...(1) mXVi X1 000 式中： X一样品中2，4-滴残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）； 样品峰在标准曲线中查得的相应浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)； V一样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； V。一一标准溶液进样体积，单位为微升（μL)； Vi——样品溶液进样体积，单位为微升（μL)； 样品质量，单位为克（g)； m 1000- 单位换算系数。 5允许差 本方法允许差10%。 6方法的最低检出限、回收率 6.1最低检出限 本方法的最低检出限为0.03mg/kg。 6.2回收率 本方法的回收率为70%～90%之间。 7液相色谱图 色谱图见图1。