ICS 67. 040 C 53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 18626—2002 肉中有机磷及氨基甲酸酯农药 残留量的简易检验方法 酶抑制法 Method for simple determination of organophosphorus and carbamatepesticideresidues in meat -Enzyme inhibition method 2002-01-28发布 2002-06-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 中华人民共 和 国 国家标准 肉中有机磷及氨基甲酸酯农药 残留量的简易检验方法 酶抑制法 GB/T186262002 * 中国标准出版社出版发行 北京西城区复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 http://www.bzcbs.com 电话：63787337、63787447 2002年4月第一版 2004年11月电子版制作 * 书号：155066·1-18311 版权专有 侵权必究 举报电话：（010)68533533 GB/T 18626—2002 前 言 本标准在制定过程中主要参考了以下标准： 美国公职分析化学师协会AOAC12h29.049-29.055《食品中有机磷农药残留测定——胆碱酯酶抑 制法》 本标准的附录A是规范性附录 本标准由辽宁省质量技术监督局提出。 本标准由沈阳农业大学、沈阳市质量技术监督局苏家屯分局负责起草。 本标准主要起草人：周艳明、高淑英、张会娟、王晓光、李亮亮、吴小琳、牛森。 1 52 GB/T 18626—2002 肉中有机磷及氨基甲酸酯农药 残留量的简易检验方法酶抑制法 1范围 本标准规定了用酶抑制法测定肉中有机磷农药及氨基甲酸酯农药残留总量的简易检验方法。 本标准适用于肉中有机磷农药及氨基甲酸酯农药残留的测定 2原理 有机磷农药及氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的活性有抑制作用，在一定条件下，其抑制率取决于农 药种类及其含量。 在pH8的溶液中，碘化硫代乙酰胆碱被胆碱酯酶水解，生成硫代胆碱。硫代胆碱具有还原性，能使 蓝色的2，6-二氯靛酚褪色，褪色程度与胆碱酯酶活性正相关，可在600nm比色测定，酶活性愈高时，吸 光度值愈低。当样品提取液中有一定量的有机磷农药或氨基甲酸酯类农药存在时，酶活性受到抑制，吸 光度值则较高。据此，可判断样品中有机磷农药或氨基甲酸酯类农药的残留情况。样品提取液用氧化剂 氧化，可提高某些有机磷农药的抑制率，因而可提高其测定灵敏度，过量的氧化剂再用还原剂还原，以免 干扰测定。 3试剂 3.1底物溶液：2%碘化硫代乙酰胆碱水溶液，1g碘化硫代乙酰胆碱，加缓冲液溶解并定容至50mL。 3.2缓冲液 pH8三羟甲基氨基甲烷（Tris）-盐酸缓冲液:50mL0.1mol/LTris加29.2mL0.1mol/L盐酸 加水定容至100mL。 3.3显色剂：0.04%2.6-二氯靛酚水溶液。 3.4氧化剂：0.5%次氯酸钙水溶液。 3.5还原剂：10%亚硝酸钠水溶液 3.6胆碱酯酶液，0.2g酶粉（其制备方法见附录A)加10mL缓冲液溶解。 3.7脱色剂：活性炭。 3.8丙酮：分析纯。 3.9碳酸钙：分析纯。 4仪器 分光光度计。 5分析步骤 以下操作可在15C～35C温度下进行。 5.1样品提取 取0.5g肉置于10mL烧杯中，加5mL丙酮浸泡5min，不时振摇，再加0.2g碳酸钙。 1 IC