ICS 67. 040 C 53 GE 中华人民共和国国家标准 GB/T5009.207—2008 糙米中50种有机磷农药残留量的测定 Determination of 50 organophosphorus pesticides residues in unpolished rice 2009-03-01实施 2008-11-21发布 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T5009.207—2008 前言 本标准的附录A、附录B为资料性附录。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准由中华人民共和国卫生部负责解释， 本标准起草单位：中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。 本标准主要起草人：沈崇钰、储晓刚、徐锦忠、沈伟健、吴斌、赵增运、陈惠兰、蒋原。 GB/T5009.207—2008 糙米中50种有机磷农药残留量的测定 1范围 本标准规定了糙米中50种有机磷农药残留量的测定方法 本标准适用于糙米中50种有机磷农药残留量的测定 50种有机磷农药在糙米中除氧化乐果、甲基乙拌磷、砜吸磷、溴硫磷、甲基吡嗯磷的检出限为 0.01mg/kg外，其余有机磷农药的检出限均为0.005mg/kg。回收率参见附录A。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准 3原理 样品经乙酸乙酯提取，凝胶渗透色谱净化后，用气相色谱-氮磷检测器检测。 4试剂和材料 除非另有规定，本标准中所用试剂均为分析纯。实验用水应符合GB/T6682中二级水的规定。 4.1正已烷（CH4）：色谱纯。 4.2乙酸乙酯（CH.O）：重蒸馏。 4.3二氯甲烷（CHzCl2）：重蒸馏。 4.4环已烷（C12H24）：重蒸馏 4.5无水硫酸钠（NazSO4）：650℃灼烧4h，冷却后储于密封容器中备用。 4.6标准品：敌敌畏、速灭磷、氧乐果、甲基内吸磷、灭线磷、二溴磷、久效磷、甲拌磷、甲基乙拌磷、乐果、 特丁硫磷、乙拌磷、乙嘧硫磷、除线磷、甲基对硫磷、皮蝇磷、矾吸磷、杀蟆硫磷、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、毒 死蜱、水胺硫磷、毒壤磷、漠硫磷、嘧啶磷、硫环磷、地安磷、毒虫畏、灭蚜磷、杀扑磷、乙基漠硫磷、完灭硫 磷、杀虫畏、灭菌磷、碘硫磷、丙环磷、丙溴磷、乙硫磷、硫丙磷、甲基吡嗯磷、敌瘟磷、亚胺硫磷、苯硫磷、 保棉磷、漠苯磷、吡菌磷、吡唑硫磷、蝇毒磷、敌杀磷、双硫磷。 4.6.1标准储备液I（500μg/mL）：准确称取敌敌畏、速灭磷、氧乐果、甲基内吸磷、灭线磷、二溴磷、久 硫磷、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、毒死蜱、水胺硫磷、毒壤磷、溴硫磷、嘧啶磷、硫环磷、地安磷、毒虫畏、灭 蚜磷、杀扑磷、乙基漠硫磷、完灭硫磷、杀虫畏、灭菌磷、碘硫磷、内环磷、内漠磷、乙硫磷、硫内磷、甲基吡 50.0mg，分别用正已烷溶解并定容至100mL。 4.6.2农药混标储备液：取0.2mL储备液I（4.6.1），用正已烷定容至100mL。 4.6.3农药混标工作液I：取5.0mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 4.6.4农药混标工作液Ⅱ：取2.5mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 4.6.5农药混标工作液Ⅲ：取1.5mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 4.6.6农药混标工作液IV：取1.0mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 1 GB/T5009.207—2008 4.6.7农药混标工作液V：取0.75mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 4.6.8农药混标工作液VI：取0.5mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 4.6.9农药混标工作液VIl：取0.2mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 4.6.10 农药混标工作液X：取0.1mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 4.6. 11 农药混标工作液X：取0.08mL农药混标储备液（4.6.2），用正已烷稀释至10mL。 5仪器 5.1气相色谱仪：具有氮磷检测器。 5.2凝胶渗透色谱仪：具有紫外检测器。 5.3均质机。 5.4旋转蒸发仪。 5.5植物粉碎机。 6试样的制备 取糙米样品，用植物粉碎机粉碎，全部过40目筛。 7测定步骤 7.1提取 2g无水硫酸钠，均质3次，每次各1min，用10mL乙酸乙酯冲洗均质头。在4℃下离心 （2500r/min），取上清液于梨形瓶中。残渣再加人40mL乙酸乙酯，重复上述均质和离心过程。 7.1.2将梨形瓶置于35℃水浴中，旋转蒸发至约0.5mL，用环已烷-二氯甲烷流动相定容至6mL，过 0.45um有机系滤膜。 7.2净化 7.2.1取5ml提取液过GPC，收集12min~25min的馏分85ml，在35℃下用旋转蒸发仪浓缩淋洗 液至约0.5mL。用正已烷定容至1mL，制成备用样液，待下一步气相色谱分离检测。 7.2.2凝胶渗透色谱条件： a) 流动相：环已烷-二氯甲烷（50十50）； b) 流速：5mL/min； c) 紫外检测波长：254nm； d) 凝胶柱填料：EnvirogelGPC凝胶"（50g），柱子规格：19mmX300mm，填料粒径：40目。 7.3气相色谱条件 7. 3. 1 HP-5熔融石英毛细管柱：30mX0.32mm内径，涂层厚度：0.25μm 7.3.2柱温：程序升温：70℃（保持2min）15℃C/min升至150℃，3℃C/min升至185℃2℃C/min升 至210℃，10℃/min升至280℃（保持10min）。 7.3.3进样口温度：250℃。 7.3.4检测器：氮磷检测器（NPD)，温度300℃C。 7.3.5氢气流速：3.0mL/min，空气流速：60mL/min； 载气（≥99.999%）流速：9.0mL/min。 7.3.6进样模式：不分流进样。 1）给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则 可使用这些等效的产品。 2 GB/T 5009.207—2008 7.4测定 7.4.1标准曲线的绘制：分别取农药混标工作液I、I、IⅢI、IV、V、V、VI、、IX、X，得到浓度范围在 0.08μg/mL～31.6μg/mL标准工作系列，分别取2μL标准溶液进GC-NPD进行分离测定。每个浓 度平行测定3次，以色谱峰面积的平均值对浓度作线性回归，得到外标曲线， 7.4.2样品测定：取2uL样液（7.2.1)进气相色谱分离测定（色谱图参见附录B)，以保留时间定性，标 准曲线定量。 7.5平行试验 按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。 7.6空白试验 除不称取试样外，均按上述步骤进行。 8结果计算 试样中50种有机磷农药的含量按式（1）进行计算： 6XA Xc XV X= :(1) 5XAsiXm 式中： X 试样中有机磷农药含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A, 样液中各有机磷农药的峰面积（i=1号～50号有机磷农药）； 标准工作溶液中各有机磷农药的浓度，单位为毫克每升（mg/L）（i=1号～50号有机磷农 药); V——最终样液的定容体积，单位为毫升（mL)； 样品质量，单位为克（g）。 9 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。 SAG 3