ICS 65.020.20 B 38 商 DB6110 洛 市 地 方 标 准 DB 6110/T 008—2021 天麻萌发菌、蜜环菌菌种生产技术规程 Technical Specification for production of Gastrodia Elata Bl. germination fungi and armillaria mellea 2021 - 12 - 08 发布 商洛市市场监督管理局 2022 - 01 - 08 实施 发 布 DB6110/T 008—2021 目 次 前言....................................................................................................................................................................... II 1 范围..................................................................................................................................................................... 1 2 规范性引用文件................................................................................................................................................. 1 3 术语和定义......................................................................................................................................................... 1 4 生产环境与设施................................................................................................................................................. 2 5 萌发菌、蜜环菌菌种的制备............................................................................................................................. 3 6 菌种质量............................................................................................................................................................. 5 7 入库..................................................................................................................................................................... 5 8 标志、包装、运输、贮藏................................................................................................................................. 6 9 生产档案............................................................................................................................................................. 6 附录 A 培养基配方（规范性附录）.................................................................................................................... 7 Ⅰ DB6110/T 008—2021 前  言 本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 本文件由丹凤县永福工贸有限责任公司提出。 本文件由商洛市农业农村局归口。 本文件起草单位：丹凤县永福工贸有限责任公司、丹凤县良种天麻产业园、丹凤县农业技术服务中 心。 本文件主要起草人：张建民、梁富斌、王秋颖、杨丹军、黄涛、庆立红、王晓敏、梁育凡、王新悦。 本文件由丹凤县永福工贸有限责任公司负责解释。 本文件首次发布。 联系方式如下： 单位：丹凤县永福工贸有限责任公司 电话：0914-3177881 地址：丹凤县峦庄镇河口村丹凤县良种天麻产业园 邮编：726202 Ⅱ DB6110/T 008—2021 天麻萌发菌、蜜环菌菌种生产技术规程 1 范围 本文件规定了天麻萌发菌、蜜环菌菌种生产技术的术语和定义、生产环境与设施、萌发菌和蜜环菌 菌种的制备、菌种质量、入库、标志、包装、运输、贮藏以及生产档案等技术要求。 本文件适用于天麻萌发菌和蜜环菌菌种的生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 191 包装储运图示标志 GB 4806.7 食品安全国家标准 食品接触用塑料材料及制品 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 12728 食用菌术语 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 2375 食用菌生产技术规范 NY 5099 无公害食品 食用菌栽培基质安全技术要求 3 术语和定义 GB/T 12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件，为使用方便，以下重复列出了GB/T 12728 中的某些术语和定义。 3.1 天麻（Gastrodia elata BL.） 天麻，又名赤箭、神草、鬼督邮、定风草等。多年生兰科草本异养植物，以干燥的块茎入药，药材 名称天麻。 3.2 萌发菌（germination fungi） 为天麻种子提供营养的石斛小菇、紫其小菇等小菇属真菌。 3.3 蜜环菌（armillaria mellea） 为天麻提供营养物质的伞菌目小皮伞科蜜环菌属真菌。 3.4 母种（stock culture） 经各种方法选育出来的具有结实性的的菌丝体纯培养物及其继代培养物，也称一级菌种、试管种。 3.5 原种（mother spawn） 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物，也称二级菌种。 1 DB6110/T 008—2021 3.6 栽培种（cultispawn） 由原种移植、扩大培养而成用于栽培的菌丝体纯培养物，栽培种只能用于栽培，不可再次扩大繁殖 菌种，也称三级菌种。 3.7 菌索（rhizomorph） 真菌菌丝体集合而成的绳索状结构。 3.8 蒴果（capsule） 呈倒卵形、卵形或纺锤形的天麻果实。 4 生产环境与设施 4.1 场地 菌种生产车间应建在空气新鲜，无污染，交通便利的地方，水、电方便。 4.2 车间设置和布局 应设置原辅料仓库、原料处理场地、洗涤室、配料室、灭菌室、预冷室、接种间、培养室、质检室、 保藏室、贮藏库等，布局科学合理。 4.3 建筑要求 车间内地面应平整且经硬化处理，便于清洗消毒和机械作业，且不易沾染杂菌孢子。 4.4 设施要求 4.4.1 灭菌室 应配备高压或常压灭菌设备，水电安全方便，通风良好。 4.4.2 预冷室 应配备降温、空气净化设备。 4.4.3 接种间 为封闭式房间，设作业通道，更衣室、缓冲间、风淋室、无菌室等，室内平整光滑，配有紫外灯和 臭氧等消毒设施。 4.4.4 培养室 应配备控温、控湿和新风系统设施。 4.4.5 保藏室 配备冰箱或冰柜，用于保藏母种和原种。 4.4.6 贮藏库 应配备制冷降温设备，通风良好，避光凉爽，用于贮藏栽培种。 2 DB6110/T 008—2021 5 萌发菌、蜜环菌菌种的制备 5.1 采集分离材料 5.1.1 萌发菌种菌 每年5月～6月，在有野生天麻分布的山林下，收集枯枝落叶，与天麻蒴果拌匀后覆土，两个月后取 萌发的原球茎作为分离材料；或在野外采集的原球茎中将侵入原球茎的萌发菌分离出来，获取萌发菌种 菌。 5.1.2 蜜环菌种菌 蜜环菌种菌分离材料主要有蜜环菌菌索、带菌索的天麻块茎、蜜环菌子实体和孢子等。 5.1.2.1 蜜环菌菌索 在夏秋季节雨晴之后，采集枯树枝或枯树桩上白色生长点及红色幼嫩的蜜环菌菌索作为分离材料； 或者将有蜜环菌菌丝的枯树枝、枯树桩带回室内培养，待其长出蜜环菌菌索后，将幼嫩菌索作为分离材 料。 5.1.2.2 带菌索的天麻块茎 在天麻采收季节，挑选健康的、带菌索的白麻、母麻或营养繁殖茎作为分离材料。 5.1.2.3 蜜环菌子实体 在天麻种植区域或野生蜜环菌生长的地方，采取发育正常、无病虫害、尚未开伞的子实体作为分离 材料。 5.1.2.4 孢子 收集子实体成熟后散出的孢子作为分离材料。 5.2 5.2.1 母种的制备 PDA 培养基配方 配方应符合附录 A.1 的规定。 5.2.2 萌发菌母种的制备 选取健壮的原球茎，清除泥土，用自来水冲洗干净，然后用无菌水冲洗数次后，置于经灭菌处理的 培养皿中，用0.1%氯化汞溶液浸泡3min～5min，用灭菌小剪刀将原球茎剪成2段～3段，在链霉素液中蘸 一下，接入PDA平面培养基中，25℃培养5d～10d，待发出菌丝后，挑取菌丝接入PDA平板培养基，如此 反复几次，即可得到纯化的母种。 5.2.3 蜜环菌母种的制备 5.2.3.1 菌索制备法 切取部份蜜环菌菌索组织，用无菌水冲洗2次～3次，放入0.1%氯化汞溶液中浸泡0.5min～1min，再