ICS 65.020.01 B 16 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1964—2020 欧洲樱桃实蝇监测技术指南 Requirement for Rhagoletis cerasi (L.) monitoring 2020-08-28 发布 内蒙古自治区市场监督管理局 2020-09-28 实施 发 布 DB15/T 1964—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 “请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。” 本标准有中华人民共和国满洲里海关提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国满洲里海关、中华人民共和国阿拉山口海关、中华人民共和国兰 州海关、中华人民共和国二连海关。 本标准主要起草人 ：刘玮琦、李兰、陈超、王溪桥、杨东来、刘振伟、任立新、袁淑珍、王旭。 I DB15/T 1964—2020 欧洲樱桃实蝇监测技术指南 1 范围 本标准规定了检疫性有害生物欧洲樱桃实蝇(Rhagoletis cerasi (L.)) 的监测准备、监测区域、监 测寄主、监测时期、监测用品、监测方法、疫情诊断和监测报告等要求。 本标准适用于进出境口岸和田间欧洲樱桃实蝇(Rhagoletis cerasi (L.)) 的监测。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 诱剂 attractant 引起昆虫向该物质源作定向运动的化学物质。 2.2 监测 survey 在一个地区内为确定某种有害生物的种群特征或存在的品种而在一定时期采取的行动。 3 原理 欧洲樱桃实蝇(Rhagoletis cerasi (L.))隶属于双翅目 Diptera，实蝇科 Tephritidae，绕实蝇属 Rhagoletis。本标准借助欧洲樱桃实蝇成虫对特定诱剂具有较强趋性的特点，辅助于特定的装置捕捉 目标成虫，并按相应的技术要求进行操作。 4 仪器及用具 4.1 仪器 体视显微镜、干燥箱、冰箱。 4.2 用具 诱捕器(参见附录 A)、手持放大镜、小型干燥器、解剖刀、解剖针、标签纸、养虫箱、40 目（孔 径 0.425 mm）防虫网罩、白瓷盘、镊子、指形管、昆虫针、医用剪刀、脱脂棉。 5 试剂 5.1 除非另有说明，在检验中仅使用确认的分析纯试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。 1 DB15/T 1964—2020 5.2 二甲苯（C8H10）、碳酸铵（(NH₄)₂CO₃）、乙酸铵（CH3COONH4）、乙醇（C2H6O）、乙酸丁酯（C6H12O2）、 福尔马林（CH2O）和冰醋酸（CH3COOH）。 6 虫情监测 6.1 成虫监测 6.1.1 监测准备 收集当地与欧洲樱桃实蝇及其寄主状况相关的信息并进行整理、分析，制定简要的监测计划。 6.1.2 监测区域 6.1.2.1 发生区 如果有欧洲樱桃实蝇的发生，重点监测发生疫情的有代表性地块和发生边缘区域。主要监测疫 情发生动态和扩散趋势。 6.1.2.2 未发生区 重点监测高风险区域，如：来自欧洲樱桃实蝇疫情发生国的寄主植物、植物产品以及其他限定 的集散地和主要消费区、运输工具、进口该昆虫寄主植物产品集散地和主要消费区等。 6.1.3 监测寄主 李属（Prunus sp.）植物：酸樱桃（Prunus cerasus），欧洲甜樱桃（Prunus avium），黑樱桃 （Prunus serotina），马哈利酸樱桃（Prunus mahaleb）；忍冬属（Lonicera sp.）植物：金银忍冬(Lonicera xylosteum)、 新疆忍冬（Lonicera tatarica）、小花忍冬（Lonicera tatarica L. var. Micrantha）；小檗属（Berberis sp.） 植物。 6.1.4 监测时期 监测时期原则上依据当地气温而定，具体方法是：当月平均温度高于 15℃时开展监测；当月平 均气温低于 10℃时，无需开展监测；当月平均温度介于 10℃与 15℃之间时，如监测区域内有寄主 果实存在或其他原因需要监测的，则需展开监测。 6.1.5 监测用品 6.1.5.1 诱剂 按碳酸铵（g）：乙酸铵（g）=1:1(质量比)进行配制。将诱剂装入带孔的 5mL 聚乙烯小瓶中， 悬挂于诱捕器上，适时更换诱剂。 6.1.5.2 诱捕器 本标准建议使用十字交叉型、圆筒型或矩形诱捕器进行监测（参见附录 A） 。 6.1.6 监测方法 6.1.6.1 监测点设置 2 DB15/T 1964—2020 6.1.6.1.1 发生区 在有欧洲樱桃实蝇发生的区域内，于疫情中心地带确定 3～5 个固定诱捕点；在疫情发生区周边 区域，根据寄主植物的分布情况，固定 10～15 个诱捕点，进行常年监测。每个诱捕点可放置 6.1.5 中三种诱捕器之一。 6.1.6.1.2 未发生区 根据欧洲樱桃实蝇的寄主植物如樱桃、忍冬属等植物的分布和风险大小，固定5～10个诱捕点， 在6.1.4中规定的监测时期内进行监测；来自欧洲樱桃实蝇疫情发生国的寄主植物及植物产品以及其 他限定的集散地和主要消费区、进口该昆虫寄主植物产品集散地和主要消费区等，根据风险大小， 固定3～5个诱捕点，进行监测。诱捕器可选择6.1.5中三种诱捕器之一。 6.1.6.2 诱捕器安放 诱捕器放置在树冠顶部阳光充足的地方。诱捕器附近安放醒目标志以防止受到人为破坏。 6.1.6.3 诱捕检查和维护 在整个监测期间，每隔 7d 检查 1 次诱捕器上的实蝇标本，如发现疑似目标实蝇的成虫可使用二 甲苯等有机溶剂将粘板上的粘胶溶解后取下标本，放入 75%乙醇溶液，贴上标本采集编号，带回实 验室鉴定。记录结果并填写检疫性实蝇诱集监测记录表（参见附录 B）。 诱捕器出现损坏或丢失的状况，应立即进行更换并做好相应的记录。更换下来的废旧诱捕器和 诱饵应集中销毁。 6.2 幼虫和蛹的监测 6月上旬至9月下旬，在樱桃园或忍冬科植物园中采集，查看果皮上有无产卵孔、脱果孔，并检 查落地果周围地表及5cm深的表土中有无幼虫和蛹。将符合附录C描述症状的果实和收集到的虫体带 回室内饲养鉴定。 6.3 疫情诊断 6.3.1 现场诊断 如发现可疑的成虫，可根据成虫的形态特征以及寄主植物的受害症状作出初步诊断，并视需要 采集有关标本。诊断可依据欧洲樱桃实蝇形态特征（参见附录D）进行鉴定。 6.3.2 室内诊断 在监测中如有可疑的虫蛀果实，解剖后发现实蝇幼虫标本，带回实验室进行封闭式饲养至成虫 进行鉴定。如发现疑似欧洲樱桃实蝇，送检鉴定。 6.3.3 标本保存 成虫制作为针插标本或浸泡标本。卵、幼虫、蛹制成浸泡标本。浸泡液为福尔马林、酒精、冰 醋酸混合液（5份福尔马林、15份80%酒精、1份冰醋酸混合而成）。填写标本标签，连同标本一起妥 善保存。 6.4 监测记录与归档 根据监测结果填写监测记录表（参见附录B和C）。 3 DB15/T 1964—2020 6.5 监测报告 对监测结果进行整理汇总形成监测报告，并按要求逐级上报。 4 DB15/T 1964—2020 AA 附 录 A （资料性附录） 欧洲樱桃实蝇诱捕器特征图 A.1 十字交叉型诱捕器 该诱捕器是用聚丙烯材料制成的两张15 cm×20 cm 的黄色粘板十字交叉组成，聚丙烯材料厚1mm。 2 粘性表面积为600 cm 。颜料波长范围500 nm～550 nm 。黄色粘板十字交叉位置设置两个小孔便于 安装盛放诱剂的小瓶。诱剂小瓶为聚丙烯小瓶。 图A.1 十字交叉型诱捕器 A.2 圆筒型诱捕器 该诱捕器用聚丙烯材料制成的黄色粘板圆筒形诱捕器，高20 cm，周长54 cm。聚丙烯材料厚0.8 mm。诱捕器所用颜料在500 nm～550 nm 波长范围（黄绿区域）内反射率最强，在300 nm～400 nm 波 长范围（紫外区域）有一个二次峰，在450 nm波长左右（蓝色区域）的反射率最低。圆筒诱捕器的 中间位置设置两小孔便于安装盛放诱剂的小瓶。诱剂小瓶为聚丙烯小瓶。 5 DB15/T 1964—2020 图 A.2 圆筒型诱捕器 A.3 矩形诱捕器 用聚丙烯材料制成的矩形黄色粘板诱捕器，长 30cm，宽 20cm。颜色为荧光黄色。使用时将矩 形黄色粘板的长边对折，用钉子通过粘板边上的孔洞将两短边固定，使有粘性的一面朝外。诱捕器 设置两小孔便于安装盛放诱剂的小瓶。诱剂小瓶为聚丙烯小瓶。 图A.3 矩形诱捕器（左：对折前图；右：对折后图） 6 DB15/T 1964—2020 附 录 B （资料性附录） 欧洲樱桃实蝇诱集监测记录表 表B.1 欧洲樱桃实蝇诱集监测记录表 诱捕器放置时间： 监测人： 监测地点（乡镇/ 村/街道）及经纬 度 寄 寄主植物 监测单位（盖章）： 诱 捕获实蝇数量/检查日期 诱捕器类型 备注 日 日 日 日 日 日 日 日 日 日 7 DB15/T 1964—2020 附 录 C （资料性附录） 欧洲樱桃实蝇诱集监测汇总表 表C.1 欧洲樱桃实蝇诱集监测汇总表 时间： 监测地点 （乡镇/村） 月 月诱集量 诱捕器数量 报告单位（盖章）： 8 年 实蝇种类 （头） 制表人签名： 监测员 填报日期： 监测单位 年 月 日 DB15/T 1964—2020 附 录 D （资料性附录） 欧洲樱桃实蝇基本信息 D.1 形态鉴定特征 D.1.1 成虫 雌虫体长4.5 mm～5.5 mm ，雄虫体长3.5 mm～4.5 mm见图D.1，黑色，头和胸部具黄色斑点。 中胸背板具4条棉毛纵纹。翅长2.5 mm～4.0 mm，无后端横带，中横带和端前横带分离，具副前缘横 带见图D.2。小盾片黄色，两侧具黑色斑纹。腹部黑色，产卵管长0.7 mm～0.8 mm。 图 D.1 雌成虫（左）雄成虫（右） ［引自Daniel C.和 Grunder J.］ 9 DB15/T 1964—2020 图 D.2 实蝇形态特征图 ［仿White & Elson-Harris］ D.1.2 卵 卵粒大约长0.70 mm～0.80 mm，宽0.20 mm～0.30 mm，乳白色。 D.1.3 幼虫 老熟幼虫长4.5mm～6.0 mm，蠕虫形，体节不骨化，白色至黄色。口感器圆形，有2个小感器。 第8腹节中间叶甚发达，胸部前气门指突12～16个；腹末气门裂长是宽的4～5倍，有一细的骨化缘。 肛叶大，突起，前有一不连续的小刺列，在肛开口下方有小集合的刺见图D.3。 10 DB15/T 1964—2020 图 D.3 幼虫 D.1.4 蛹 围蛹，淡黄色，圆柱形，长约3.0 mm～4.0