ICS CCS 65.020.20 B 220 45 4 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 DBB45/T 226 69—2021 白及 及组培培苗生 生产技术规程程 Technical code of practice foor Bletilla stria ata produuction with tisssue culture 布 2021-002-05 发布 -03-05 实施 实 2021- 广西壮 壮族自治区 区市场监督 督管理局 发 布 目 次 — DB45/T 2269 2021 前言 ................................................................................ III 1 范围 ............................................................................... 1 2 规范性引用文件 ..................................................................... 1 3 术语和定义 ......................................................................... 1 4 瓶苗培育 ........................................................................... 1 5 驯化苗培育 ......................................................................... 2 附录 A（资料性） 组培苗培育各阶段培养基配方 ........................................... 4 附录 B（资料性） 白及组培苗主要病虫危害症状及防治方法 ................................. 5 I — DB45/T 2269 2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由广西壮族自治区农业科学院提出并宣贯。 本文件由广西农业种植业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所、广西美泉新农业科技有限公司。 本文件主要起草人：石云平、许娟、苏祖祥、李小泉、韦绍龙、吴志红、林茜、桂杰、徐文柳、 韦惠章、青钟准。 III — DB45/T 2269 2021 白及组培苗生产技术规程 1 范围 本文件规定了白及组培苗生产的技术要求。 本文件适用于广西行政区域内白及组培苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 DB45/T 2262 白及种苗质量要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 白及 Bletilla striata (Thunb.) Reichb.f. 3.2 兰科白及属多年生草本植物。茎基部具膨大的假鳞茎，呈扁球形，富粘性，具有广泛的药用价值。 丛生芽 cluster bud 继代增殖培养获得的具有3个芽以上的无菌芽丛。 4 瓶苗培育 4.1 外植体 4.1.1 外植体选择 选用植株健壮、无病虫害、成熟高、饱满且未开裂的蒴果。 4.1.2 外植体灭菌 在超净工作台上，将外植体直接用75％乙醇灭菌30 s，再用0.1％～0.2％ HgCl灭菌10 min，无菌水 冲洗5次。 4.2 培养基配方 组培苗培育各阶段培养基配方见附录A。 4.3 培养条件 1 — 温度（25±1） ℃，湿度30％～60％，光照强度2 000 lx，光照时间12 h/d。 DB45/T 2269 2021 4.4 培养过程 4.4.1 初代培养 在超净工作台上，将蒴果用无菌纸吸干表面水分，切掉果蒂，露出种子，用镊子夹住另一端，抖动 蒴果，使种子均匀分布在初代培养基的表面。培养60 d后获得无菌小芽。 4.4.2 继代增殖培养 将初代培养出的无菌小芽分成2～3个芽为小丛，接种在继代增殖培养基上培养60 d，增殖系数为 4.37，增殖代数控制在12代以内。 4.4.3 壮芽培养 在继代增殖系数大、芽较弱小时，将继代增殖丛生芽切分成2～3个芽小丛，接入壮芽培养基中培养 50 d。 4.4.4 生根培养 经过壮芽后的丛生芽切分成单芽，接入生根培养基中培养，成为完整小植株。 5 驯化苗培育 5.1 设施要求 宜采用钢架结构，单栋育苗棚长30 m、宽6 m，棚顶至地面高度2.5 m。棚周围距地面上60 cm至肩高 2.5 m处应配备40目防虫网，距地面2.5 m处的棚周和棚顶宜选择厚度0.08 mm～0.10 mm的薄膜。棚外设1 层遮光率60％～75％活动式遮阳网，并配备喷灌设施。 5.2 苗床准备 应选择背风向阳，排灌良好，地势平坦的地块。苗床高为20 cm，宽1 m，长度14 m。脱脂松树皮使 用1％石灰水浸泡24 h，滤干水后备用。苗床底层铺设10 cm黄心土，中层铺设6 cm沙子，上层铺设4 cm 脱脂松树皮。 5.3 假植炼苗 将组培瓶苗放入炼苗大棚，自然光条件下炼苗7 d～15 d。移栽前3 d将瓶盖打开，移栽前1 d向瓶苗 内淋入适量的洁净水。强光照和温度高时，应采用遮阳网遮阳。 5.4 移栽管理 苗床温度宜保持在20 ℃～28 ℃；空气相对湿度维持在70％以上；苗床脱脂松树皮湿度保持在80％ 以上，移栽7 d内，每天早晚用喷灌设施喷施水雾2次。小苗抽生新芽后每10 d可用2％磷酸二氢钾溶液进 行叶面喷施。 5.5 病虫害防治 2 — 白及组培苗育苗期常见的病虫害为假鳞茎腐烂病、叶斑灰霉病、蚜虫和小菜蛾等。使用药剂应符合 GB/T 8321（所有部分）的规定。危害特征及防治方法见附录B。 DB45/T 2269 2021 5.6 驯化苗质量 驯化苗质量要求应符合DB45/T 2262的规定。 3 — DB45/T 2269 2021 附 录 A （资料性） 组培苗培育各阶段培养基配方 组培苗各阶段培养基配方见表A.1。 表A.1 组培苗各阶段培养基配方 配方 培育时期 基本培养基 初代培养 6-BA NAA KT IBA IAA （mg/L） （mg/L） （mg/L） （mg/L） （mg/L） 1.0 0.1 - - - 继代增殖培养 MS+30 g/L 白糖 2.0 0.2 0.2 - - 壮芽培养 +4 g/L 琼脂 - 0.2 1.0 - - 0.2 - - 0.5 0.5 生根培养 4 DB45/T 2269—2021 附 录 B （资料性） ） 白及组培苗主 白 主要病虫危害 害症状及防治 治方法 白及及组培苗主要 要病虫危害症 症状及防治方方法见表B.1。 表B.1 白及组培培苗主要病虫 虫危害症状及 及防治方法 病害/虫虫害名称 假鳞茎腐腐烂病 叶斑灰灰霉病 蚜虫 危害症状 假鳞茎呈水 水渍状腐烂，切切开假鳞茎，中 中部变 黑 黑并有菌丝，腐 腐烂可蔓延至根根部变黑死亡；新叶 基 基部变黑，其余 余叶面部分出现现褐变长枯斑，严重 时 时叶片全部褐变 变枯死。 叶片出现褐 褐色点状或条状状病斑，严重时 时呈褐 色 色不规则大型病 病斑，且多个病病斑相互合并，直至 覆 覆盖全部叶片， 导致叶片枯死死。 在叶片上刺 刺吸汁液，使叶叶片黄化卷缩，直至 枯 枯萎。 防防治方法 多施有机肥和磷 多 磷钾肥，加强排 排水和田间管管 理；可用 50％多菌灵灵可湿性粉剂 500 5 倍～800 倍 液或 80％代森锰锌可 8 可湿性粉剂 1 000 0 倍～1 5000 倍液灌 灌根。 可用35％异菌• 可 •腐霉利悬浮剂 剂稀释600倍～～ 800倍液 液喷雾。 可用 可 60％吡蚜酮酮可湿性粉剂 8 g/667 m ～ 11 g/6667 m 兑水 30 kkg 在盛发期及时用药。 可 用 200 g/LL 氯 虫 苯 甲 酰 胺 悬 浮 剂 g/667 m ～10.0 gg/667 m 或 1500 g/L 茚虫威乳乳 将叶片咬成 成孔洞、缺刻或或网状，叶片受伤 7.5 g/667 m ～7.00 g/667 m 或200％氟虫双酰胺胺 后 后极易受到病原 原菌侵害，导致致叶片枯萎死亡 亡。 油5.0 可湿性 性粉剂 3.0 g/6667 m ～5.0 g//667 m ，兑水水 30 kg，在低龄幼虫盛盛发期喷药。 2 2 2 小菜菜蛾 2 2 2 2 2 5 中华人民共和国广西地方标准 白及组培苗生产技术规程 DB 45/T 2269―2021 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究