ICS 65.020.01 B 16 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 28069—2011 根螨检疫鉴定方法 Detection and identification of bulb mites (Rhizoglyphus spp.) 2011-12-30发布 2012-06-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T28069—2011 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。 本标准起草单位:福建农林大学、中华人民共和国福建出人境检验检疫局。 本标准主要起草人:范青海、陈艳、林阳武、苏秀霞 GB/T28069—2011 根螨检疫鉴定方法 1范围 本标准规定了根螨属螨类(Rhizoglyphusspp.)的检疫鉴定以雌、雄成螨的形态特征为鉴定依据; 明确了根螨属螨类现场检疫、实验室分离与饲养、标本制作、样品保存的方法。 本标准适用于蔬菜、花卉、中药材等根螨寄主植物球根、球茎、鳞茎及块茎中根螨的检疫鉴定。 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 颚体 gnathosoma 位于身体前端或前端腹面,由颚基和两对附肢即螯肢和须肢组成。 2. 2 躯体 idiosoma 蜱螨颚体后方的体段,常以围颚沟与颚体分开,占身体的大部分,多呈囊状。 2.3 前足体propodosoma 第一对和第二对足着生的体段。 2. 4 后足体 metapodosoma 第三对和第四对足着生的体段。 2.5 格氏器 Grandjean's organ 粉螨前足体前侧缘形成的一环绕颚体基部的薄骨板,为指状或叉状等多种形状, 2.6 生殖吸盘 genital papillae 生殖区内小型杯状或盘状结构,偶尔具柄,位于生殖板上、生殖孔或散布于生殖孔两侧的体 壁上。 2.7 肛吸盘anal suckers 粉螨等螨类的雄螨交配器,位于肛门两侧的一对大型吸盘。 SAG 2.8 踏节吸盘 tarsal suckers 雄成螨特有特征。位于节IV,由节毛(d,e)特化而成的构造。 2. 9 生殖褶 genital fold 无气门螨类遮盖生殖孔的分叉形的褶。 1 GB/T 28069—2011 2. 10 克氏器Claparede'sorgan 仅发现于前幼螨和幼螨期的一种器官,位于前、中两足基节之间,具柄和半球形的端部,或呈凹陷状 结构。 3根螨基本信息 根螨学名:Rhizoglyphusspp.。 英文名:bulbmites。 属蜱螨亚纲Acari、真螨总目Acariformes、疥螨目Sarcoptiformes、粉螨科Acaridae。 根螨各发育螨态都可随货物、土壤、包装材料以及运输工具远距离传播;近距离传播主要以休眠体 (第二若螨)附在昆虫等动作上或随真菌孢子等扩散。此外根螨本身可做小范围移动。 根螨寄主植物的相关资料参见附录A。 4方法原理 特征进行鉴定。 5仪器、试剂 5.1仪器与用具 放大镜、体视显微镜、生物显微镜(具油镜)、解部刀、镊子、挑针、环形针、指形管、小培养血皿、吸管、小 号驼毛笔、载玻片、盖玻片、电热板、干燥箱、贝氏漏斗(Berlesefunnel)、标签、铅笔、油漆笔。 5.2试剂 除另有规定外,所有试剂均为分析纯。 5.2.1奥氏液(Oudemansfluid):液浸标本保存液。配方:70%乙醇87mL、冰醋酸8mL、甘油5mL。 5.2.2内氏液(Nesbitt'sfluid):标本清洗、软化液,经过清洗的标本透明、舒展。配方:水合氯醛40g、 浓盐酸2.5mL、蒸馏水25mL。 5.2.3霍氏液(Hoyersmedium):玻片标本封固液。配方:水合氯醛100g、阿拉伯胶15g、甘油 10mL、蒸馏水25mL。 5.2.4中性树胶(NeutralBalsam):玻片标本封片液。 6现场检验 检查蔬菜、花卉、中药材等植物鳞茎、球茎、块茎、根茎和块根等表面有无腐烂、裂缝、伤口以及土壤, 肉眼或放大镜下若发现有乳白色囊状物,即有可能是根螨或粉螨科其他属的螨类,需要带回实验室做进 一步检查鉴定。 2 GB/T28069—2011 7实验室检测 7.1检测方法 7.1.1表面检测 在放大镜或体视显微镜下检查植物体表面,重点检查有病菌发生的腐烂组织以及有裂缝或伤口的 组织,借助解部刀和挑针仔细检查,若有乳白色囊状物活动,需要调整显微镜放天倍数检查,确认是螨类 后,用挑针或驼毛笔挑人盛有奥氏液的指形管中,同时放人采集标签,并登记采集地点、时间、输出国家 或地区、寄主、采集人等内容。 7.1.2贝氏漏斗分离 取待检植物活体、残片、土屑等放置于贝氏漏斗网上,漏斗下放置承接器皿,器皿内放少量清水,以 防螨逃逸或干死。用40W灯泡为热源,烘烤干燥24h,然后将承接器皿放在体视显微镜下检查,发现 螨类后,挑人盛有奥氏液的指形管,并做好标签和记录。 7.2根螨的饲养 对无法确定种类的卵、幼螨、若螨,可将其放置在盛有酵母片的培养血或指形管里,然后放于温度为 25℃~30℃、相对湿度90%以上的黑暗培养箱里饲养,同时做好饲养记录。数天至十多天后发育为成 螨,在体视显微镜下进行初步观察,制作成玻片标本,再进行鉴定 7.3标本制作 7.3.1清洗 7.3.2制片 在载玻片上滴1滴~2滴的霍氏液。从内氏液中挑出根螨,触碰滤纸去除多余液体,然后放人霍氏 液,整姿后,盖上盖玻片,放在60W白炽灯或500W电热板上加热至气泡排出,用油漆笔在载玻片下方 标出螨体位置,并写明采集标签(见图1)。在低倍显微镜下检查、调整螨体位置,用40倍以下物镜进行 初步鉴定。 粉螨科ACARIDAE 标本馆名称 中國名; 寄主: 学名: 采集地点: 鉴定人: 采集时间; 鉴定日期: 采集人; 鉴定编号: 标本编号: 图1玻片标本标签标注方法图示 7.3.3玻片标本保藏 将玻片标本放在50℃左右干燥箱中干燥,1周后即可用于油镜(100倍)观察。干燥约3个月后,在 盖玻片周围封中性树胶,继续干燥1d~2d即可在常温下保存,也可置于干燥器中长期保存。 3

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