ICS 11. 220 B 41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 18649—2014 代替GB/T18649—2002 牛传染性胸膜肺炎诊断技术 Diagnostic techniques of contagious bovine pleuropneumonia 2014-09-30发布 2015-03-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 中 华 人民共 #和国 国家标准 牛传染性胸膜肺炎诊断技术 GB/T18649—2014 * 中国标准出版社出版发行 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029） 北京市西城区三里河北街16号（100045) 网址：www.gb168.cn 服务热线：400-168-0010 010-68522006 2014年9月第一版 * 书号：155066·1-49775 版权专有 侵权必究 GB/T18649—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准代替GB/T18649—2002《牛传染性胸膜肺炎（牛肺疫）诊断技术》。本标准与GB/T18649- 2002相比，主要技术变化如下： 删除了其中的微量凝集试验； 一修改了其中的补体结合试验； 增加了聚合酶链式反应（PCR）检测方法和C-ELISA检测方法。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181）归口。 本标准起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。 本标准主要起草人：辛九庆、李媛 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T18649—2002。 I GB/T18649—2014 牛传染性胸膜肺炎诊断技术 1范围 本标准规定了牛传染性胸膜肺炎的病原学检查、聚合酶链式反应（PCR）、补体结合试验、竞争 ELISA（C-ELISA）试验诊断技术要求。病原学检查和聚合酶链式反应（PCR）适用于急性、亚急性及慢 性病牛的病原诊断，补体结合试验和竞争ELISA（C-ELISA)试验适用于牛传染性胸膜肺炎感染牛的抗 体检测。 2流行病学 健康牛和病牛接触，由呼吸道吸入病牛的“飞沫”是本病的主要传染途径。在该病的常在地区多见 亚急性和慢性病程，以地方流行性为特点。但在新发生本病地区以急性经过为主。慢性病牛长期带菌， 成为隐蔽的传染源。 3临床症状 暴发流行时多呈急性病程，体温在41℃以上稽留。呼吸系统症状非常明显，表现为：呼吸困难，呈 腹式呼吸，咳嗽弱而无力，有浆液或脓性鼻汁流出。食欲废绝。 4病理变化 SAC 急性期病变以浆液渗出性纤维素性胸膜肺炎，间质多孔多汁，肺小叶出现各期肝变、多色，呈大理石 样肺，肺胸膜和肋胸膜粘连，以及胸腔渗出液大量潴留为特征。转为慢性后逐渐形成肺包膜或坏死块。 5病原分离鉴定 5.1材料准备 10%马血清马丁肉汤和琼脂培养基：见附录A。 5.2病料采集 用灭菌器械（注射器、剪刀、青霉素瓶、棉拭子等）无菌采集关节液、胸腔积液、鼻腔拭子和全血，关节 液和胸腔渗出液置于青霉素瓶内。 5.3病料的保存 病料均放入4℃冰箱内保存，并在24h内送到指定实验室。如果在24h内不能送达，应放人 一20℃冰箱内保存。 5.4培养方法 在无菌条件下吸取胸腔渗出液或关节液0.1mL～0.3mL接种于培养基中即可。鼻腔拭子用 1