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ICS 07.080 G 66 中华人民共和国国家标准 GB/T 34797—2017 核酸引物探针质量技术要求 Quality technical requirements of primers and probes 2017-11-01发布 2018-05-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 34797—2017 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口。 本标准起草单位:中国测试技术研究院生物研究所、中国测试技术研究院、苏州金唯智生物科技有 限公司、深圳华大基因研究院、深圳市计量质量检测研究院 本标准起草人:周李华、李怀平、马丽侠、刘明东、郝军政、蒋慧、王智、叶德萍、史谢飞、杨国武 谭和平。 5AG GB/T 34797—2017 核酸引物探针质量技术要求 1范围 本标准规定了DNA引物探针的质量评价指标、技术要求、试验方法、包装运输和储存要求。 本标准适用于DNA引物探针等寡核苷酸产品的质量评价及其检测 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T191包装储运图示标志 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T19495.1转基因产品检测通用要求和定义 GB/T30988多酚类植物基因组DNA提取纯化及测试方法 3 术语和定义 GB/T19495.1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 寡核苷酸oligonucleotide 二至三十个核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段。寡核苷酸可由仪器自动合 成,它可作为DNA合成的引物、基因探针等 注:在使用这一术语时,对核苷酸残基的数目并无严格规定,在不少文献中,把含有三十甚至更多个核苷酸残基的 多核苷酸分子也称作寡核苷酸。 3.2 引物 primer 人工合成的两段寡核苷酸序列,一段与目的基因一端的一条DNA模板链互补,另一段与目的基因 另一端的另一条DNA模板链互补 3.3 探针probe 一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的基因互补的核酸序列。 3.4 定制序列 custom sequence 客户提供的DNA序列及合成要求等信息。 3.5 定制引物 custom primer 客户提供的DNA引物序列及合成要求等信息。 1 GB/T34797—2017 3.6 定制探针 custom probe 客户提供的DNA探针序列、修饰集团及合成要求等信息。 3.7 1OD单位 1OD 在1mL体积1cm光程标准比色血中,260nm波长下吸光度为1的寡核苷酸溶液。 3.8 序列比对 alignment 为确定两个或多个序列之间的相似性和同源性,而将它们按照一定的规律排列并分析的过程。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid) DSL:脱盐(desalination) HAP:新型寡核苷酸纯化(highaffinitypurification) HPLC:高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography) MS:质谱(mass spectrometer) OD:光密度(opticaldensity) OPC:寡核苷酸纯化柱(oligonucleotidepurificationcartridge) PAGE:变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamidegelelectrophoresis) 5质量评价要求 5.1 技术要求 DNA引物探针产品质量控制指标及技术要求应符合表1的规定。 表1DNA引物探针产品质量技术要求 产品种类 指标 要求 总量"OD ≤10% 碱基准确性 与定制引物序列一致 脱盐(如DSL等) ≥75% 过柱"(如OPC、HAP等) ≥85% 纯度 PAGE级 ≥90% 引物 HPLC级 ≥95% 脱盐(如DSL等) ≤25% 过柱(如OPC、HAP等) ≤15% 碱基缺失率 PAGE级 ≤10% HPLC级 ≤5% 相对分子质量。 <0.05% 2 SAG
GB-T 34797-2017 核酸引物探针质量技术要求
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