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ICS 07.080 A 21 中华人民共和国国家标准 GB/T 38571—2020 植物次生代谢物生物碱的检测 液相色谱-质谱法 Determination of alkaloids as plant secondary metabolites- Liquid chromatography-mass spectrometry 2020-03-31实施 2020-03-31发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T 38571—2020 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由中国标准化研究院提出并归口。 本标准起草单位:中国测试技术研究院生物研究所、河北省食品检验研究院、中国标准化研究院、 河北医科大学、中国计量大学。 本标准主要起草人:张岩、范素芳、马爱进、冯德建、马春玲、文迪、丛斌、王娟、吕品、叶子弘。 1 GB/T38571—2020 植物次生代谢物生物碱的检测 液相色谱-质谱法 1范围 本标准规定了用液相色谱-串联质谱仪检测植物次生代谢产物生物碱的方法。 本标准适用于(-)-东碱、番木罄碱、乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、秋水仙碱、阿托品、士的宁、喜 树碱、毛果芸香碱、鬼白毒素的测定。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 样品经提取液超声提取、离心后,用液相色谱-串联质谱仪测定,外标法定量。 4. 试剂或材料 除非另有规定,所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的一级水。 4.110%(体积分数)乙睛溶液 10mL乙腈十90mL去离子水,混勾。 4.2 2甲酸 色谱纯。 4.3 0.1%(体积分数)甲酸水溶液 准确移取甲酸1.0mL置于1L容量瓶中,用水定容,混匀。 4.41%(体积分数)甲酸-乙腈溶液 1mL甲酸十99mL乙腈,混匀。 4.5 5100mmol/L乙酸铵溶液 称取乙酸铵3.854g,用去离子水溶解,定容至500mL。 4.6 6乙酸铵-氨水缓冲液,pH9 取100mL100mmol/L乙酸铵溶液,用氨水调pH到9.0±0.5。 1 S4G GB/T38571—2020 4.7 7生物碱 纯度均不小于98%。 4.8 31mg/mL生物碱储备液 准确称取0.100g相应的生物碱分别置于100mL容量瓶中,用甲醇定容,配制成浓度为1mg/mL 的储备液,于4℃避光保存,有效期2个月。 4.9 910mg/L混合标准储备液 树碱、毛果芸香碱、鬼白毒素标准储备溶液1.0mL于100mL容量瓶中,用甲醇定容,混匀,配制成 (-)-东著碱、番木鳖碱、乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、秋水仙碱、阿托品、士的宁、喜树碱、毛果芸香碱、 4.10微孔滤膜 0.22μm,有机相。 5仪器设备 5 5.1 5.2 2电子天平:感量为0.0001g和0.001g。 5.3 离心机:最高转速不低于9500r/min。 5.4超声波清洗仪 5.5 5氮吹仪。 5.6 涡旋混合器。 5.7 7匀浆机。 5.8 离心管:10mL、50mL 6 试样制备 6.1 植物组织、动物组织 植物组织、动物组织等固体样品,绞碎并使其均质。 6.2 体液 血液、尿液等液体样品,将取得的全部原始样品充分混匀后,待测。 7试验步骤 7.1试样提取 7.1.1植物组织、动物组织 称取植物组织试样1g(精确至0.001g)于50mL离心管中,加人5mL去离子水,涡旋混合2min,加 入10mL乙,涡旋混合1min,超声辅助提取10min,加入4g无水硫酸镁,迅速振摇1min,9500r/min 2
GB-T 38571-2020 植物次生代谢物生物碱的检测 液相色谱-质谱法
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