ICS 07.080 CCS A 40 中华人民共和国国家标准 GB/T 40176—2021 植物源性产品中木二糖的测定 亲水保留色谱法 Determination of xylobiose in plant-derived products- Hydrophilic intention chromatography 2021-12-01实施 2021-05-21发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T 40176—2021 前言 本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)归口。 限公司、华谱科仪(北京)科技有限公司、利津县检验检测中心。 本文件主要起草人:胥传来、王锋、马爱进、顾丰颖、郝帅、李博、朱金锦、许润琦、丁雅楠、刘培瑜、 李秀婷、李鹏。 1 GB/T 40176—2021 植物源性产品中木二糖的测定 亲水保留色谱法 1范围 本文件规定了植物源性产品中木二糖的高效液相亲水保留色谱测定方法。 本文件适用于植物源性产品中的木二糖的测定。 2规范性引用文件 2 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文 件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于 本文件。 GB/T6682 2分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样用水提取,去除脂肪、蛋白质、淀粉、非淀粉糖等杂质,木二糖的还原端与1-苯基-3-甲基-5-吡唑 啉酮(PMP)发生衍生反应,生成具有强紫外吸收的稳定产物,对其采用高效液相亲水保留色谱紫外检 测,外标法定量。 5 试剂和材料 除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 5.1试剂 5.1.1 乙腈(CH.CN):色谱纯。 5.1.2 无水乙醇(CHCH,OH)。 5.1.3 丙酮(CH,COCH)。 5.1.4 甲醇(CH:OH)。 5.1.5 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)(C1aHioN,O)。 5.1.6 三氯甲烷(CHCI:)。 5.1.7 盐酸(HCI)。 5.1.8 氢氧化钠(NaOH)。 5.1.9 磷酸(HPO):色谱纯 5.1.10 木二糖(C1oH18Og,CAS号:6860-47-5):纯度≥99.0%。 1 GB/T40176—2021 5.2 2试剂配制 5.2.1 PMP甲醇溶液(0.5mol/L):称取87.1gPMP,加甲醇溶解并定容至1L。 5.2.2 氢氧化钠溶液(0.3mol/L):称取1.2g氢氧化钠,加水溶解并定容至100mL。 5.2.3盐酸溶液(0.3mol/L):量取25mL浓盐酸,加水溶解并定容至1L。 5.2.4 磷酸水溶液(0.1%):量取1mL磷酸,加水溶解并定容至1L。 5.3 标准溶液配制 5.3.1 标准储备液 称取0.1g木二糖,精确至0.0001g,用水溶解并定容至100mL,配制成质量浓度约为 1000μg/mL的标准储备液,储存于4℃条件下,在1个月内使用。 5.3.2标准工作液 移取2.5mL标准储备液(5.3.1)用水定容至25mL容量瓶,分别从容量瓶中移取0.1mL、 0.25mL、0.5mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL于10mL容量瓶中,用水定容至刻度,配制成质量浓度分别 为1.0μg/mL、2.5μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL的系列标准溶液, 现用现配。 6 仪器设备 6.1高效液相色谱仪:带紫外检测器 6.2 色谱柱:亲水保留色谱柱(基质键合两性离子或中性酰胺官能团)。 6.3 天平:感量为0.01g、0.0001g。 6.4 涡漩混合器 6.5 5离心机:离心力10000g。 6.6 样品粉碎机。 6.7 微孔滤膜(水相):0.45μm。 6.8 通风橱。 7 试样的制备和保存 7.1 试样制备 7.1.1 固体样品 取植物源性样品至少200g,用粉碎机粉碎,并通过孔径为0.25mm(60目)标准筛,混匀,装入洁净 容器,密封并标记。 7.1.2半固体和液体样品 取植物源性样品至少200g(mL),充分混匀,装入洁净容器,密封并标记。 7.2 2保存 SAC 易变质试样置于0℃~4℃保存。 2

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