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ICS 71.040.40 Y 43 中华人民共和国国家标准 GB/T 40189—2021 牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定 高效液相色谱法 Determination of metronidazole and norfloxacin in toothpaste- High performance liquid chromatography method 2021-12-01实施 2021-05-21发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T 40189—2021 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会(SAC/TC492)归口。 本标准起草单位:江苏省产品质量监督检验研究院,江苏省理化测试中心,南京晓庄学院 本标准主要起草人:洪华、高宏、林红英、潘虹、孙长恩、朱利利、黄惠、肖苏熠、朱宇宏、张晓强、王莉、 蔡晶、马慧娟、张初、王玮。 GB/T40189—2021 牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了牙膏中禁用抗生素类药物甲硝唑和诺氟沙星含量的高效液相色谱(HPLC)测定 方法。 本标准适用于牙膏中禁用抗生素类药物甲硝唑和诺氟沙星含量的测定。 本标准方法检出限为1mg/kg。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 样品用提取液提取后,上清液经0.45um滤膜过滤,用高效液相色谱-紫外检测法测定,保留时间定 性,外标峰面积法定量。 试剂和标准物质 4 除非另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。 4.2乙睛(流动相用):色谱纯。 4.3磷酸:分析纯。 4.4三乙胺:分析纯。 4.5甲硝唑标准储备液:称取0.1g(精确至0.0002g)甲硝唑标准品到100mL容量瓶中,加提取液定 容至刻度线,甲硝唑质量浓度为1mg/mL,作为标准储备液备用。 4.6诺氟沙星标准储备液:称取0.1g(精确至0.0002g)诺氟沙星标准品到100mL容量瓶中,加提取 液定容至刻度线,诺氟沙星质量浓度为1mg/mL,作为标准储备液备用。 4.7混合标准溶液:分别移取甲硝唑和诺氟沙星标准储备液各10mL至100mL容量瓶中,加提取液 定容至刻度线。配制成质量浓度为100mg/L的甲硝唑、诺氟沙星混合标准溶液。经0.45um滤膜过滤。 5 仪器和设备 5.1高效液相色谱仪:配有二极管阵列检测器。 5.2分析天平:感量为0.0001g。 5.3 pH计。 1 GB/T401892021 5.4 4超声波清洗器。 5.5 5高速离心机。 5.6 6比色管:25mL。 6试样制备 牙膏样品挤弃约20mm后,准确称取5g样品(精确至0.0001g)至25mL比色管中,加人提取液 (4.1)至刻度线,涡旋振荡2min,25℃以下水浴超声10min。静置后移取上清液10mL至10mL具塞 离心管,4000r/min离心10min,0.45um滤膜过滤待测。 7高效液相色谱测定 7.1 液相色谱参考条件 液相色谱参考条件如下: a) 色谱柱:Cis不锈钢柱(250mm×4.6mm×5μm)。 b) 检测波长:290nm。 流动相:0.1%(体积分数)磷酸水溶液:乙睛(83:17,体积比)用三乙胺调节pH值到2.5~3.0 (P 流速:1.0mL/min。 柱温:30℃。 f) 进样量:10uL。 7.2 2标准工作液制备 将100mg/L的混合标准储备溶液(4.7)用流动相液逐级稀释,配制成50mg/L、20mg/L、10mg/L、 5mg/L的标准工作液。经0.45μm滤膜过滤备用。在设定色谱条件下,分别取10μL进行分析。以标 准系列溶液的质量浓度为横坐标(mg/L)、对照品峰面积为纵坐标绘制校准曲线(线性相关系数R》 0.9990)。甲硝唑和诺氟沙星混合标准样品液相色谱图参见附录A中图A.1。 7.3 测定步骤 氟沙星的响应值应在标准曲线的线性范围内,超过线性范围则应稀释后再进样测定。 7.4 空白试验 除不加试样外,均按第6章的处理步骤和7.1的仪器条件进行检测。 8结果计算 结果按式(1)计算,计算结果保留两位有效数字。 (1)... m×100 式中: X试样中甲硝唑和诺氟沙星的质量分数,单位为毫克每千克(mg/kg); 通过标准曲线求得试样溶液中的甲硝唑和诺氟沙星的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); p 通过标准曲线求得的空白试剂中甲硝唑和诺氟沙星的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L); 2
GB-T 40189-2021 牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定 高效液相色谱法
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