ICS 67.060 x 04 中华人民共和国国家标准 GB/T 2795—2008 代替GB/T2795—1981 冻兔肉中有机氯及拟除虫菊酯类农药 残留的测定方法 气相色谱/质谱法 Method for determination of organochlorine and pyrethroid Pesticide multiresidues in rabbit tissues-GC-MS method 2009-01-01实施 2008-09-10发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 2795—2008 前言 本标准代替GB/T2795一1981《出口冻兔肉六六六、滴滴沸残留量检验方法》。 本标准与GB/T2795—1981相比主要区别如下： 将原方法中的被分析物六六六、滴滴沸8种扩大到24种有机氯、3种杀螨剂和14种拟除虫菊 酯类农药； 将填充柱更换为毛细柱； 一气相色谱-质谱同时确证和测定代替气相色谱-电子捕获检测器测定； 本标准的附录A、附录B、附录 C均为资料性附录 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局 本标准主要起草人：王云凤、葛宝坤、陈其勇、常春艳、高建会、王伟、宓捷波、刘有序、彭杨思、刘旸 赵孔祥。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T2795—1981。 1 GB/T2795—2008 冻兔肉中有机氯及拟除虫菊酯类农药 残留的测定方法气相色谱/质谱法 SAG 1范围 本标准规定了冻免肉中41种有机氯及拟除虫菊酯类农药残留量气相色谱/质谱的测定方法。 本标准适用于冻兔肉中α-666、β-666、林丹、-666、0，力-滴滴滴、P，P-滴滴伊P，-滴滴沸、0，P 滴滴涕、七氯、环氧七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、氯丹、四氯硝基苯、五氯硝基苯、α-硫丹、β-硫丹、硫 丹硫酸盐、六氯苯、甲氧滴滴沸、氯菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、S-氰戊菊酯、甲氰菊酯、联苯菊酯、氯氰菊 酯、胺菊酯、三氟氯氰菊酯、醚菊酯、氟氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、苯醚菊酯、生物苄夫菊酯、乙酯杀螨醇、三 氯杀螨醇、三氯杀螨、氯杀螨、杀螨特、溴螨酯41种农药残留量的测定 2原理 试样用环已烷十乙酸乙酯混合溶剂均质提取，提取液浓缩后经凝胶渗透色谱和固相萃取净化，浓 缩，气相色谱-质谱仪检测，外标法定量。 3试剂和材料 所有试剂除另有说明外，均为色谱纯，水为二次蒸馏水。 3.1乙腈。 3.2环已烷。 3.3乙酸乙酯。 3.4环己烷十乙酸乙酯混合溶剂（1+1,体积比）。 3.5正已烷。 3.6正已烷饱和的乙睛：向100mL乙睛中加人100mL正已烷，充分振摇后，静置分层，取下层乙睛 备用。 3.7甲苯。 3.8丙酮。 3.9无水硫酸钠，分析纯：用前在650℃灼烧4h，储存于干燥器中，冷却后备用 3.10中性氧化铝固相萃取小柱，500mg，3mL或相当者：用前使用2mL正已烷饱和的乙睛活化。 3.11农药标准物质：纯度≥95%。 3.12标准储备溶液。 3.13准确称取10mg（精确至0.1mg）各农药标准物，分别置于10mL容量瓶中，用甲苯溶解并定容 至刻度。 3.14混合标准溶液 按照农药的性质和保留时间，将41种农药按照附录A中表A.1所规定的浓度分成四组，用甲苯配 制成混合标准溶液。混合标准溶液避光4℃保存，可使用1个月。 3.15基质混合标准工作溶液 按照附录A中表A.1所规定的浓度，分别取四组混合标准溶液0、0.05、0.10、0.25、0.5mL，加样 基质混合标准工作溶液使用前配制。 1 GB/T2795—2008 4仪器 4.1气相色谱-质谱仪：配有电子轰击源（EI)。 4.2凝胶渗透色谱仪：内装Bio-Beads S-X3填料的净化柱。 4.3分析天平：感量0.1mg和0.01g各一台。 4.4 旋转蒸发器。 4.5 5均质器：最大转速为24000r/min。 4.6离心机：最大转速为5000r/min。 4.7金 氮气吹干仪。 5 试样制备与保存 样品用绞肉机绞碎，充分混勾，用四分法缩分至不少于500g，作为试样，装人清洁器内，加封后，标 明标记。试样于-18℃冷冻保存。 6测定步骤 6.1提取 称取约10g试样，精确到0.01g，放人装有20g无水硫酸钠（3.9）的50mL离心管中，加35mL乙 酸乙酯-环已烷混合溶剂（3.4），均质1min，把离心管放人离心机中，在4000r/min离心5min，上清液 通过装有无水硫酸钠的漏斗，收集于100mL鸡心瓶中，离心管中的组织残渣再用35mL乙酸乙酯-环 提取液旋转蒸发至约1mL，浓缩液转移至GPC自动进样系统的样品管中，用乙酸乙酯-环已烷混合溶 剂（3.4）洗涤旋转蒸发瓶两次，洗涤液合并至样品管中并定容至10mL。 6.2凝胶渗透色谱净化 6.2.1条件 a）净化柱：200mmX25mm，内装Bio-BeadsS-X3填料； b) 检测波长：254nm； c) 流动相：乙酸乙酯-环已烷混合溶剂（3.4）； 流速：4.7mL/min； e) 进样量：5mL； f) 开始收集时间：7.5min； 结束收集时间：15min。 6.2.2净化 样液过滤后通过5mL样品环注人GPC柱，收集7.5min~15min馏分于100mL鸡心瓶中，并在 40℃水浴旋转蒸发至约1mL,待过氧化铝固相萃取柱（3.10）。 6.3固相萃取净化 将上述样液加到已活化的氧化铝固相萃取柱内，用5mL正已烷饱和的乙睛（3.6）洗脱，收集洗脱 液于40℃氮气吹至近干，用1.0mL丙酮溶解残渣，供GC-MS测定。 6.4测定 6.4.1气相色谱-质谱条件 a)1 b) 色谱柱温度：40℃保持1min，然后以30℃/min程序升温至130℃，再以5℃/min升温至 250℃，再以10℃/min升温至300℃，保持5min； c) 载气：氮气，纯度≥99.999%，流速为1.0mL/min； 2 GB/T 2795—2008 进样口温度：280℃； e) 进样量：1μL； f) 进样方式：不分流进样，0.75min后打开分流阀； g) 电子轰击源：70eV； 离子源温度：180℃； i) GC-MS接口温度：280C； j) 选择离子监测：按附录A选择每种化合物的定量离子和定性离子，每组所有需要检测的离子 按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与 定性离子的丰度比值参见附录A，每组检测离子的开始时间和驻留时间参见附录B。 6.4.2定性测定 四组样品溶液按照气相色谱-质谱测定条件分别测定。进行样品测定时，如果检出的色谱峰保留时 间与标准品的保留时间相一致，并且在扣除背景后样品质谱中，所选择的离子均出现，经过对比所选择 离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在表1允许的范围内，则可判断样品中存在对应的被测 物。四组标准物质的选择离子监测质谱图参见附录C。 表1使用气相色谱-质谱定性时相对离子丰度最大允许误差 相对丰度/% >50 >20~50 >10~20 <10 GC/MS定性时相对离子丰度 ±10 ±15 ±20 ±50 最大允许误差/% 6.4.3定量测定 定量应采用基质混合标准工作溶液，标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近，并且保证所测样 品中农药的响应值均在仪器的线性范围内，外标法定量测定。 7结果计算 按式（1)计算试样中每种农药的残留量，计算结果需扣除空白。 AXcXV X= ...(1) A,Xm 式中： 试样中每种农药的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A——试样中每种农药的色谱峰面积； 标准工作溶液中每种农药的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； CR V- 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； A——标准工作溶液中每种农药的色谱峰面积； 最终试样体积所代表的试样量，单位为克（g）。 m 8测定低限 本标准方法的测定低限参见附录A。 9精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。 3